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選購微量分光光度計(jì)時(shí)需考慮哪些問題
更新時(shí)間:2012-06-13   點(diǎn)擊次數(shù):2080次

分光光度計(jì)作為實(shí)驗(yàn)室中較為常用的儀器之一,從低端到,五花八門,大家在選擇時(shí)可能有些無所適從。而只有從實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際需要出發(fā),才能挑選出較為合適的儀器。

①你們實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)應(yīng)用有哪些?未來會增加或改變嗎?

②你需要測量的樣品體積范圍?如果它變化很大,你需要著重考慮分光光度計(jì)的樣品量和靈活性。

③你是否需要同時(shí)測量多個(gè)樣品?

④你需要什么樣的靈敏度?對于低濃度樣品,3-5 nm的帶寬比窄帶寬(1 nm)儀器的一致性更好。

⑤有多少人會共用這一臺分光光度計(jì)?如果多人共用,預(yù)設(shè)程序可能會比較方便。有一些硬性指標(biāo),在選購時(shí)不得不看。分光光度計(jì)的波長范圍是選購時(shí)要考慮的重要因素之一。

自從03Nanodrop推出*微量分光光度計(jì),立即受到各分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一致追捧和好評。僅需0.5-1ul的樣品體積,對于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)來說,不僅意味著大大減少檢測損耗的樣品,也因?yàn)闄z測光徑減小而減少了對高濃度樣品如核酸或蛋白進(jìn)行梯度稀釋的需求,實(shí)在太方便。近期的*微量分光光度計(jì)市場可真是熱鬧,各*如NanoDrop、BioTek、島津等,都爭相推出了力作。讓人欣喜的是,我們還看到了可與*媲美的國產(chǎn)分光光度計(jì),這說明國內(nèi)的儀器市場也在不斷地創(chuàng)新。因此,如何選擇一臺合適的微量分光光度計(jì)顯的尤為重要。

在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,一臺覆蓋紫外光和可見光的分光光度計(jì)是*的。分光光度計(jì)的帶寬(bandwidth)很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測量。對于定量分析而言,3-5nm比較合適??勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺分光光度計(jì)滿足多種實(shí)驗(yàn)需要,當(dāng)然,價(jià)格也更高。在檢測器方面,CCD陣列更為普及。它具有非常高的量子效率、噪聲比光電二極管陣列低100倍,不僅光利用率得到改善,信噪比也得以提高。

另外,CCD陣列系統(tǒng)采用模塊化處理,使儀器在穩(wěn)定性方面更優(yōu)于如光電倍增管(PMTs)等單點(diǎn)真空管檢測器。樣品量也是重要的考量因素。以前的比色皿,動輒50 ul,對于珍貴樣品來說那可真是大出血。

因此現(xiàn)在面向分子生物學(xué)的分光光度計(jì)都趨向于微量化了(揮發(fā)性樣品不宜)。近期推出的幾款分光光度計(jì),都無需比色皿,將樣品滴在特殊的表面上即可測量,所需的樣品量在2 ul或以下。這種方法檢測范圍*寬,無需對樣品進(jìn)行稀釋。稀釋樣品不僅耽誤時(shí)間,在準(zhǔn)確性上也是大打折扣。

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